1、原理、蛋白质含有两个以上的肽键,因此有双缩脲反应。
2、双缩脲反应是指蛋白质在碱性溶液中与二价铜离子结合,生成紫红色络合物的反应。
3、其颜色的深浅与蛋白质的含量成正比,而与蛋白质的相对分子质量和氨基酸的组成无关。
4、操作方法,标准曲线的制作、于试管中分别加入0,0.0.0.0.0ml的1%标准酪蛋白溶液,用水补足1ml。
5、然后各加入4ml双缩脲试剂,充分摇匀在室温下反应30min,于540nm波长下测定光吸收率。
6、以酪蛋白的含量为横坐标,光吸收值为纵坐标,绘制标准曲线。
7、样品测定取样品溶液1ml加入4ml双缩脲试剂,摇匀后在室温下反应30min,测定光吸收值,从标准曲线查出蛋白质含量。
8、生物帮上面有详细的介绍,Z保护性氨基酸单体及衍生物http、//product.bio1000.com/101195/。
二、斐林试剂的使用方法是先 再 ,双缩脲试剂的使用方法是先 再1、斐林试剂的使用方法是先混合再加入,双缩脲试剂的使用方法是先加入氢氧化钠,再加入硫酸铜。
三、双缩脲试剂成分是什么?使用过程要注意什么?1、双缩脲试剂是由双缩脲试剂A和双缩脲试剂B两种试剂组成.双缩脲试剂A的成分是氢氧化钠的质量分数为0.1g/mL的水溶液。
2、双缩脲试剂B的成分是硫酸铜的质量分数为0.01g/mL的水溶液.双缩脲试剂可以验证蛋白质的存在.具体方法是、先将双缩脲试剂A加入组织样液,摇荡均匀(必须营造碱性环境),在加入双缩脲试剂B,摇荡均匀.如果组织里含有蛋白质,那么会看到溶液变成紫色.具有两个或两个以上肽键的化合物皆可与双缩脲试剂产生紫色反应.蛋白质的肽键在碱性溶液中能与Cu2+络合成紫红色的化合物.颜色深浅与蛋白质浓度成正比.双缩脲(NH2CONHCONH2)是两个分子脲经180℃左右加热,放出一个分子氨后得到的产物.双缩脲试剂本是用来检测双缩脲,因蛋白质中也有-CONH-基也可用于检验蛋白质,与蛋白质接触后的颜色呈紫色.。
四、在鉴定蛋白质样品是,加双缩脲试剂的正确操作方法是?1、先加双缩尿试机A液(质量浓度为0.1g/并大molNAOH溶液),震荡后加拍蔽塌入B液(质量浓度为0.01g/molCuSO4溶液)然后震荡袭圆摇匀。
五、斐林试剂的使用方法是先 再 ,双缩脲试剂的使用方法是先 再1、斐林试剂的使用方法是先混合再加入,双缩脲试剂的使用方法是先加入氢氧化钠,再加入硫酸铜。
六、双缩脲试剂的使用为什么一定要先加A液再加B液1、双缩脲试剂由0.1g/ml氢氧化钠和0.01g/ml硫酸铜组成。
七、斐林试剂的使用方法是先 再 ,双缩脲试剂的使用方法是先 再1、斐隐培林试剂的使用方法是先混合再加入,双缩脲试剂的灶姿唯使用方法是先加入氢氧化册庆钠,再加入硫酸铜。
八、双缩脲试剂 怎么配?1、碱性条件下,双缩脲h2n-co-nh-co-nh2可以和cu离子作用生成紫色沉淀。
2、灵敏度差,测定范围窄,样品需要量大,不同的蛋白质产生颜色的深浅相近,因此它常用于需要快速,但并不需要十分精确的蛋白质测定。
3、干扰测定的物质包括有、在性质上是氨基酸或肽的缓冲液,如TrIs缓冲液,因为它们产生阳性呈色反应,铜离子也容易被还原,有时出现红色沉淀。
4、配制、双缩脲试剂A是质量分数为0.1g/mL的NaOH水溶液。
5、双缩脲试剂B是质量分数为0.01g/mL的CuSO4水溶液。
6、先在待测液中加入双缩脲试剂A3mL,振荡均匀(营造碱性环境),再加入1~2滴双缩脲试剂B,振荡均匀。
7、如果待测液里含有蛋白质,那么会看到溶液变成紫色。
8、具有两个或两个以上肽键的化合物皆可与双缩脲试剂产生紫色反应。
9、蛋白质的肽键在碱性溶液中能与Cu2+络合成紫色的络合物。
10、颜色深浅与蛋白质浓度成正比。
11、以上内容参考、百度百科-双缩脲试剂。
九、斐林试剂和双缩脲试剂的用法1、斐林试剂是检测糖类的,60°C加热会有砖红色沉淀。
2、双缩脲试剂是检测蛋白质的,会变成淡紫色。