VvmiR160s/VvARFs赤霉素诱导葡萄单性结实过程中的相互作用及其时空表达/裂解产物葡萄花的发育过程影响果实类型、产量和品质。因此，研究葡萄花发育的分子调控机制是必要的。用赤霉素处理过的葡萄浆果在几个方面表现出显著的上调。葡萄花组织中的科，包括miR159s和miR160s，这些miRNAs在g a信号传导中的潜在作用。实验采用6年生‘罗萨里奥·比安科’葡萄品种(欧洲葡萄)，在普通的田间条件下生长。将葡萄串浸泡在50 mg L− 1通用航空3(溶解在0.2%吐温-20中)处理30秒，并且在开花后21天将水处理的葡萄串用作对照。GA处理的植物在处理后9天达到开花。在不同时间点处理0 h、2 h、1、5、9、10、45和95d后，从不同处理组的不同枝条上随机采集花序和浆果样品。样品用于表型特征，另一部分样品立即冷冻在液氮中，并储存在80°C下直至使用。使用我们改进的CTAB方法从上述葡萄组织中分离总RNA。将低分子量RNA (LMW RNA)和高分子量RNA (HMW RNA)用4 M氯化锂分离。然后，将LMW RNA反向转录成cDNAs，用于miR-RACE克隆。不同阶段HMW RNA样品的混合物被直接逆转录成用于测量qRT-PCR的cDNAs。所有cDNAs在使用前都储存在80°C。将一群根癌土壤杆菌EHA105在含有利福平(50μg/mL)和卡那霉素(50微克/毫升− 1)的培养皿培养后，将细菌沉淀并重悬于悬浮缓冲液(10 mM MES，10 mM MgCl2，pH 5.6)中。然后将悬浮液调节至OD600 = 0.5，100 μmol L− 1在悬浮液用于渗透之前加入乙酰丁香酮，并在室温下静置4小时。通过注射用细菌悬浮液渗透6周龄烟草植物的叶子。用注射器针头在烟叶上打小孔，然后用无针注射器将细菌悬浮液注入这些小孔中。然后将渗透的幼苗移回环境室并在黑暗中保持3d。2天后用30微米GA和50微米GA对烟叶进行处理。将均匀大小的叶片用于渗透实验，该实验重复三次。为了研究遗传算法的效果在葡萄花发育和单性结实过程中的作用，我们比较了GA3-在不同时间点相对于未处理的对照植物(CK)的处理的‘Rosario Bianco’葡萄品种，处理后0小时、2小时、1天、9天、10天、45天和95天。其中，GA处理在开花后21天进行，GA处理的植物在第9天达到开花，而对照植物与未处理的对照植物相比，处理的植物在第5天和第9天表现出显著的早期开花和穗长的显著增加。剥下芽后进一步观察，GA效果在‘Rosario Bianco’葡萄花序上更为明显。处理在第5天和第9天强烈观察到明显的花形态，结果暗示处理对诱导‘蔷薇’葡萄单性结实有显著效果。综上所述，本研究探讨了外源赤霉素诱导葡萄单性结实过程中‘蔷薇’花和浆果发育的形态学变化。此外，还分析了VvARF与不同植物物种中其他同源基因的保守和多样性系统发育关系。所有vv mir 160和VvARF10/16/17已经显示了响应GA的常见顺式元件，这支持了它们在GA介导的葡萄单性结实中的功能。时空表达和相关性分析表明VvmiR160a/b/c是负调控的关键因子VvARF10/16/17赤霉素诱导葡萄花和浆果发育过程中的靶基因。GA介导的葡萄单性结实是至关重要的，并为理解VvmiR160s及其受体的分子机制提供了重要的依据。参考文献【1】孙X，张，朱晓东，柯瑞宁，陶R，陈W，等。植物microRNAs及其靶基因的鉴定与验证研究进展。生理植物。2014年;152:203–18.【2】王C，冷晓萍，张，卡耶什E，张，孙X，等。葡萄发育过程中microRNAs对其靶基因调控模式动态变化的全转录组分析。植物分子生物学。2014年;84:269–85.【3】谷歌学术杨，徐敏，宣L，姜晓梅，黄。杨树中20个ARF基因的鉴定及表达分析。吉恩。2014年;544:134–44.【4】Zouine M，傅，Chateignerboutin AL，Chateigner-Boutin AL，Mila I，等。番茄ARF基因家族的特征揭示了包括选择性剪接在内的多水平转录后调控。公共科学图书馆一号。2014年;9:e84203。【5】用于花药发育和花粉形成。BMC植物生物学。2017;17:243.谷歌学术侯，翟晓燕，李晓燕，薛燕，王，杨，等。利用小RNA和degradome测序技术对蓝莓果实成熟相关miRNAs及其靶标的比较分析。国际分子科学杂志。2017年;18:2767.#翟晓燕简介#